Porcine Acute Diarrhea Syndrome Coronavirus (SADS-CoV) เป็นโคโรนาไวรัสที่ทำให้เกิดโรคในลำไส้ในสุกรที่เพิ่งค้นพบใหม่ ซึ่งอาจทำให้ท้องเสียเป็นน้ำในลูกสุกรแรกเกิด และก่อให้เกิดความสูญเสียทางเศรษฐกิจอย่างมีนัยสำคัญต่ออุตสาหกรรมสุกรปัจจุบันยังไม่มีวิธีทางซีรัมวิทยาที่เหมาะสมในการประเมินประสิทธิผลของการติดเชื้อและวัคซีน SADS-CoV ดังนั้นจึงมีความจำเป็นเร่งด่วนที่ต้องใช้การทดสอบภูมิคุ้มกันที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) เพื่อชดเชยข้อบกพร่องนี้ที่นี่ พลาสมิดลูกผสมซึ่งแสดงออกโปรตีน SADS-CoV spike (S) ที่หลอมรวมกับโดเมน IgG Fc ของมนุษย์ถูกสร้างขึ้นเพื่อผลิตบาคูโลไวรัสลูกผสมและแสดงออกในเซลล์ HEK 293Fโปรตีน S-Fc ถูกทำให้บริสุทธิ์ด้วยโปรตีน G เรซิน และคงสภาพปฏิกิริยาด้วยแอนติบอดีต้าน Fc ของมนุษย์และต้าน SADS-CoVจากนั้นโปรตีน S-Fc ถูกใช้เพื่อพัฒนา ELISA ทางอ้อม (S-iELISA) และทำให้สภาวะปฏิกิริยาของ S-iELISA เหมาะสมที่สุดจากการวิเคราะห์ค่า OD450nm ของ 40 SADS-CoV ซีรั่มเชิงลบที่ยืนยันโดยการทดสอบอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์ (IFA) และ Western blotting ค่าจุดตัดถูกกำหนดเป็น 0.3711ค่าสัมประสิทธิ์การแปรผัน (CV) ของซีรั่มบวก SADS-CoV 6 ตัวภายในและระหว่างการวิ่งของ S-iELISA ทั้งหมดน้อยกว่า 10%การทดสอบปฏิกิริยาข้ามพบว่า S-iELISA ไม่มีปฏิกิริยาข้ามกับซีรั่มไวรัสสุกรอื่น ๆนอกจากนี้ จากการตรวจหาตัวอย่างซีรัมทางคลินิก 111 ตัวอย่าง อัตราความบังเอิญโดยรวมของ IFA และ S-iELISA เท่ากับ 97.3%การทดสอบการทำให้เป็นกลางของไวรัสด้วยค่า OD450nm ที่แตกต่างกัน 7 ค่าของซีรัมแสดงให้เห็นว่าค่า OD450nm ที่ตรวจพบโดย S-iELISA มีความสัมพันธ์เชิงบวกกับการทดสอบการทำให้เป็นกลางของไวรัสสุดท้าย ดำเนินการ S-iELISA กับตัวอย่างซีรัมฟาร์มสุกร 300 ตัวอย่างชุดเครื่องมือเชิงพาณิชย์ของ enteroviruses สุกรอื่น ๆ แสดงให้เห็นว่าอัตราบวก IgG ของ SADS-CoV, TGEV, PDCoV และ PEDV เท่ากับ 81.7%, 54% และ 65.3% ตามลำดับ, 6% ตามลำดับผลการวิจัยพบว่า S-iELISA มีความเฉพาะเจาะจง มีความละเอียดอ่อน และสามารถทำซ้ำได้ และสามารถใช้ตรวจหาการติดเชื้อ SADS-CoV ในอุตสาหกรรมสุกรได้บทความนี้ได้รับการคุ้มครองโดยลิขสิทธิ์สงวนลิขสิทธิ์.
เวลาที่โพสต์: 22 มิถุนายน-2021